简介:摘要目的以diquat诱导的小鼠氧化应激为模型,研究微生物源性抗氧化剂(MA)对小鼠肝脏氧化应激、内质网应激、细胞凋亡和功能的影响。方法选择体质量16~18 g的C57BL/6雌性小鼠18只,随机分为3组,每组6只。抗氧化剂组小鼠灌胃MA,对照组和模型组小鼠灌胃等量等渗盐水,饲养22 d后,模型组和抗氧化剂组腹腔注射diquat溶液,对照组小鼠注射等量等渗盐水,处理3h后处死小鼠采集肝组织。肝脏组织制成10%匀浆后,依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。肝脏组织制成10%匀浆后,依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果过氧化氢在对照组、模型组、抗氧化剂组分别为(8.74±1.38)、(11.44±1.01)、(9.81±0.98)mmol/g,组间比较差异有统计学意义(F = 7.640,P < 0.05)。对照组、模型组和抗氧化剂组MDA的含量分别为(0.65±0.07)、(0.86±0.18)、(0.70±0.05)nmol/mg,组间比较差异有统计学意义(F = 5.406,P < 0.05)。模型组AST活性为(146.68±4.29)U/g,显著高于对照组的(125.64±15.69)U/g与抗氧化剂组的(126.57±1.82)U/g,F = 6.192,P < 0.05。实时定量PCR结果显示,与对照组相比,模型组蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和活化转录因子6(ATF6)基因相对表达量显著升高,分别为1.880±0.442和1.800±0.380(F值分别为7.702、10.815,P值均< 0.05);与模型组相比,抗氧化剂组PERK和ATF6基因相对表达量显著降低,分别为1.310±0.333、1.180±0.204(P值均< 0.05)。细胞凋亡相关基因表达结果显示,抗氧化剂组caspase3和caspase8基因相对表达量分别为1.136±0.381、1.593±0.407,与模型组的1.572±0.127和2.843±0.973相比,显著降低(F值分别为12.800、7.657,P值均< 0.05)。结论微生物源性抗氧化剂减弱diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和肝细胞凋亡,改善肝脏功能。