简介:摘要目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine, Dex)预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI)时心肌组织内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)的影响。方法雄性SD大鼠45只,230~270 g,按随机数字表法分为3组(每组15只):假手术组(S组)、缺血/再灌注组(I/R组)、右美托咪定+缺血/再灌注组(D+I/R组)。采用结扎左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery, LAD )30 min后松结再灌注6 h的方法构建MI/RI模型。Dex经右侧颈内静脉泵注,先以1.0 μg‧kg-1‧h-1泵注10 min,再以0.7 μg‧kg-1‧h-1泵注15 min。通过伊文蓝和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC)双染色法检测心肌缺血面积及心肌梗死面积,实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, RT-qPCR)检测心肌组织ERS相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)及炎症因子IL-1β、IL-6 mRNA的表达水平,Western blot检测心肌组织GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量。结果与S组比较,I/R组和D+I/R组心肌梗死面积和心肌缺血面积增加(P<0.05),GRP78、CHOP、IL-1β、IL-6 mRNA水平升高(P<0.05),GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高(P<0.05)。与I/R组比较,D+I/R组心肌梗死面积减少(P<0.05),GRP78、CHOP、IL-1β、IL-6 mRNA水平降低(P<0.05),GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论Dex预处理可以有效抑制大鼠MI/RI时的ERS,减轻心肌细胞凋亡和炎症反应。
简介:摘要目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38MAPK)-肌质网Ca2+-ATP酶2α(sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca2+ ATPase 2α, SERCA2α)信号通路在大鼠心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury, I/RI)中的作用。方法采用随机数字表法将45只雄性SD大鼠(体重250~300 g)分为A组、B组和C组(每组15只),其中A组用于测定心肌梗死面积,B组用于检测心肌组织p38MAPK和SERCA2α蛋白量,C组用于检测心肌组织SERCA2α mRNA。分别将A组、B组和C组组内大鼠按随机数字表法分为3组(每组5只):假手术组(Sham组)、缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)组(I/R组)、I/R+SB203580组(I/R+S组)。I/R+S组于术前1 h腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580(2 mg/kg),其余两组于术前1 h仅注射等体积生理盐水。采用结扎冠状动脉左前降支(left anterior descending, LAD)30 min后再灌注10 min的方法建立大鼠心肌I/RI动物模型。再灌注结束后,动脉血气分析法监测大鼠内环境状态,Western blot法检测心肌组织磷酸化p38MAPK(phospho-p38MAPK, p-p38MAPK)、SERCA2α蛋白水平,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)法检测心肌组织SERCA2α mRNA水平,伊文蓝及2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC)双染色法测定心肌缺血和心肌梗死面积。结果各组大鼠血气分析结果差异无统计学意义(P>0.05)。与Sham组比较,I/R组与I/R+S组心肌梗死面积与心肌组织中p-p38MAPK蛋白水平明显增加(P<0.05)、SERCA2α蛋白及mRNA水平明显降低(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+S组心肌梗死面积明显减少、p-p38MAPK蛋白水平明显降低(P<0.05),SERCA2α蛋白和mRNA水平明显升高(P<0.05)。结论p38MAPK可能通过介导SERCA2α参与大鼠心肌I/RI。
简介:摘要目的研究大鼠在体心肌过表达血管紧张素转化酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)是否通过迷走神经调控高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box 1, HMGB1 ),从而对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI)产生保护作用。方法雄性SD大鼠50只,体重220~280 g,按随机数字表法分为5组(每组10只):假手术组(S组)、缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)组、单侧迷走神经切断术(unilateral vagotomy, VG)+I/R组(V组)、ACE2+I/R组(A组)、VG+ACE2+I/R组(VA组)。ACE2过表达在术前3周通过经腹心包腔注射腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)获得。I/R模型为结扎左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery, LAD) 30 min后恢复灌注24 h。ELISA法测定血清中肌钙蛋白I (cardiac troponin I, cTnI)浓度,Western blot法检测心肌组织中HMGB1水平,实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qPCR)检测心肌组织中TNF-α mRNA和IL-6 mRNA水平,伊文蓝及2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积。结果与I/R组比较,A组心肌梗死面积明显减少(P<0.05),心肌组织HMGB1蛋白水平下调(P<0.05)、TNF-α mRNA和IL-6 mRNA下调(P<0.05),血清cTnI浓度明显降低(P<0.05);与A组比较,VA组以上指标均明显升高(P<0.05)。结论ACE2过表达通过迷走神经调控HMGB1能够减轻MI/RI,对大鼠心肌产生保护作用。