简介:摘要目的探讨下调Sp1基因表达对胶质瘤细胞放射敏感性的影响。方法设计并合成编码shRNA的寡核苷酸序列,克隆入LV3(H1/GFP&Puro)载体中构建重组体。然后重组慢病毒分别感染U251和U87细胞,嘌呤霉素筛选得到稳定转染细胞株。荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测细胞中Sp1 mRNA和蛋白表达水平;克隆存活法检测细胞存活;流式法检测细胞周期;免疫荧光法检测DNA损伤程度。结果两株胶质瘤细胞在感染72 h后荧光显微镜观察Sp1慢病毒载体均高表达,RT-PCR和蛋白质印迹法结果显示转染后shRNA-U87和shRNA-U251细胞Sp1 mRMA和蛋白表达量均明显降低(P<0.01),Sp1敲除率达90%以上。shRNA-U251和shRNA-U87细胞在10%细胞存活水平下的放射增敏比(SER)分别为1.39和1.18;两株Sp1敲除组细胞经辐照后G2/M期比率及γ-H2AX foci数目与对照组相比均极显著增大。结论shRNA沉默Sp1增大了X线诱导的G2/M期阻滞,加重了DNA双链断裂程度,提高了胶质瘤细胞的放射敏感性。
简介:摘要:国家的发展往往离不开有效合理的国土资源配置,国土测绘工程的有效进行可以使国家更加精准地收集国家的土地信息。传统的测绘工程测量大多数都是在野外进行测量,使用传统的测量方式不仅工作效率不高,且依据测绘数据绘得的成图精密度也不高。不利于进行地理测绘。为了提高野外测量绘制水平,在工程测绘中引用GPS测绘技术对工程进行精密的测量进入的大众的视野。本文将对利用GPS测绘技术进行测绘工程测量做出一定的分析。
简介:摘要高三对于学生们来说是十分重要的时期,在这个阶段,学生不仅仅要完成知识的积累,还要能够完成能力的提升,随着当前新课程改革的不断深入,化学的题目也变得越来越新颖,那么这就要求学生们能够具备扎实的基础知识功底,并且能够灵活地加以运用,具备较强的应用能力。下面,本文就高三阶段的化学复习教学展开具体的叙述,具体探讨在化学复习教学中所应该要加强的关键点。