摘要
摘要目的评价肝缺血再灌注大鼠外泌体对小胶质细胞焦亡的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠20只，2~3周龄，体重20~50 g，采用随机数字表法分为2组(n＝10)：假手术组(S组)和肝缺血再灌注组(I/R组)。取S组及I/R组大鼠血清，使用超速离心法提取外泌体。将PKH26标记的外泌体与小胶质细胞共孵育6 h，采用免疫荧光法检测外泌体的摄取。将原代小胶质细胞以5×105个/ml的密度接种于6孔板，采用随机数字表法分为4组(n＝6)：对照组(C组)、107个/ml肝缺血再灌注外泌体组(107组)、108个/ml肝缺血再灌注外泌体组(108组)和109个/ml肝缺血再灌注外泌体组(109组)。依次给予相应浓度肝缺血再灌注外泌体共孵育6 h。采用Western blot法检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved-caspase-1)和消皮素D(GSDMD)的表达。采用随机数字表法将原代小胶质细胞分为3组(n＝24)：对照组(C组)、假手术外泌体组(S-exosome组)和肝缺血再灌注外泌体组(I/R-exosome组)。S-exosome组和I/R-exosome组分别给予108个/ml的S组、I/R组外泌体孵育6 h。采用RT-PCR法检测NLRP3、ASC和GSDMD mRNA的表达，采用ELISA法检测上清液IL-18、IL-1β和TNF-α的浓度。结果肝缺血再灌注外泌体与小胶质细胞存在共定位。108个/ml和109个/ml肝缺血再灌注外泌体上调NLRP3、ASC、GSDMD和cleaved-caspase-1的表达(P<0.01)。与C组和S-exosome组比较，I/R-exosome组NLRP3、ASC和GSDMD mRNA的表达上调，上清液IL-18、IL-1β和TNF-α的浓度升高(P<0.01)。结论肝缺血再灌注大鼠外泌体可促进小胶质细胞焦亡。
出版日期
2022年12月13日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
