尿毒症毒素硫酸吲哚酚在体外对人肾小球足细胞骨架的损伤及其机理研究

在线阅读 下载PDF 导出详情
摘要 摘要目的硫酸吲哚酚(IS)是一种公认的结合蛋白质的肠源性尿毒症毒素,在慢性肾脏病患者体内蓄积可导致和促进慢性肾脏病的发生和发展。本实验探索了IS是否能引起人肾小球足细胞骨架的损伤及其可能的机理。方法以体外培养的人肾小球足细胞系作为研究对象。采用台盼蓝拒染法、MTT法检测足细胞活力;采用免疫荧光法检测足细胞骨架纤维状肌动蛋白(F-actin)、骨架蛋白Synaptopodin改变;Western印迹法分析骨架蛋白Synaptopodin蛋白水平;RT-qPCR法检测Synaptopodin mRNA表达;琼脂糖凝胶电泳法分析足细胞内蛋白激酶A(PKA)活性。结果IS使足细胞F-actin、Synaptopodin蛋白荧光减弱;IS还下调Synaptopodin的mRNA (P<0.01)。IS刺激使PKA磷酸化增多;PKA通路阻断剂H89可以上调Synaptopodin的蛋白及mRNA表达(P=0.002)。结论IS可下调足细胞骨架F-actin、Synaptopodin表达,PKA信号通路可能部分参与了Synaptopodin表达的调节,本研究结果为防治和干预CKD发生发展提供了新的思路和潜在的治疗靶点。
出版日期 2020年08月21日(中国期刊网平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
  • 相关文献