摘要
摘要目的探讨PTTG1基因在乙醇诱导的LO2肝细胞急性损伤中的作用。方法LO2肝细胞中加入0、100、200、400、800、1 600 mmol/L不同浓度的乙醇，0、3、6、12、24、48 h不同刺激时间进行预实验，镜下观察细胞形态摸索乙醇损伤模型适合的参数。使用携带PTTG1 shRNA的荧光慢病毒载体感染LO2正常人肝细胞系，嘌呤霉素筛选PTTG1敲低稳转株组（PTTG1/KD组），同时建立空载病毒对照组（PTTG1/vector组），两组按摸索参数加入400 mmol/L乙醇作用24 h。HE染色观察各组细胞爬片的形态变化及损伤程度。Western blot检测PTTG1、凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3等的表达情况。多组PTTG1表达比较采用单因素方差分析和LSD-t检验，两组比较采用t检验。结果预实验镜下发现，LO2肝细胞在400 mmol/L及24 h出现明显肝细胞急性损伤形态差异，确定为模型实验参数。PTTG1表达量随乙醇浓度升高和时间增加而增加，于400 mmol/L乙醇浓度、24 h达最高（LSD-t=6.90，4.14；P<0.05）。HE染色发现乙醇组中PTTG1/KD组凋亡细胞较PTTG1/vector组增多。Western blot结果显示，PTTG1/KD组PTTG1表达量为0.22±0.11，明显低于PTTG1/vector组的1.09± 0.11（t=-11.60，P<0.05）；而PTTG1/KD组的Cleaved-Caspase3表达量为0.05±0.01，明显高于PTTG1/vector组的0.03（t=8.20，P<0.05）。结论乙醇能引起LO2肝细胞PTTG1基因表达变化，而该基因可减轻乙醇诱导的肝细胞凋亡，可能在急性酒精性肝损伤中起到抗凋亡的保护作用。
出版日期
2020年08月10日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
