简介:基金项目国家自然科学青年基金(项目编号81102482)摘要目的构建人钙联蛋白S100A8的原核表达载体并进行蛋白表达及纯化,以便进一步研究。方法从人单核巨噬细胞THP-1中提取总RNA,逆转录后进行PCR,得到目的基因,与TA克隆载体pMD-T进行连接,得到pMD-S100A8质粒,经BamHⅠ和XhoI双酶切产物或者PCR产物双酶切后,与大肠杆菌pGEX-6P-1表达载体进行连接,得到pGEX-S100A8重组质粒。重组质粒转入E.coliBL21(DE3)表达菌进行蛋白表达。融合GST蛋白用GST柱纯化,冷冻干燥,进行下一步研究。结果成功构建了TA克隆质粒pMD-S100A8及阳性pGEX-S100A8重组质粒,成功诱导蛋白的原核表达。结论纯化得到的蛋白为进一步研究S100A8钙联蛋白的结构和功能提供了参考。
简介:目的观察扶正抑癌方抗大肠癌肝转移的作用,并探讨其可能的作用机制.方法将40只BALB/C裸鼠随机分为5组:模型组、中药组、化疗组、防治组、联合组,以5×106个/ml浓度的LoVo细胞悬液0.2ml接种于裸鼠脾脏,建立大肠癌肝转移模型.后4组分别予扶正抑癌方治疗、5-Fu治疗、扶正抑癌方防治、扶正抑癌方+5-Fu治疗,分别从移植瘤和转移瘤的重量、形态学以及血清癌胚抗原浓度来观察扶正抑癌方的疗效.结果与模型组相比,防治组、联合组、化疗组脾脏接种瘤、肝脏转移瘤重量均减轻(P<0.05),其中联合组低于化疗组(P<0.05);而且联合组、化疗组CEA含量明显降低(P<0.05).中药组上述指标无显著差异(P>0.05).结论扶正抑癌方联合5-Fu可以降低模型动物的肝转移发生率,抑制脾脏接种瘤、肝脏转移瘤的生长.
简介:[目的]探讨高职护生在护理技能开放练习中应用“临床教学机器人”辅助训练对提高护理操作综合能力的效果。[方法]选取高职护生2015级60名、2016级50名、2017级60名,共170名,随机分为对照组和观察组(2015级对照组30名和观察组30名,2016级对照组25名和观察组25名,2017级对照组30名和观察组30名),均选取“静脉输液法”“壁式氧气吸入法”两个项目进行开放练习,观察组应用“临床教学机器人”辅助开放练习,对照组统一观看教学视频后再回训练室进行练习,比较两组护生两项考核项目的操作流程的完整性、知识点掌握程度评分和操作时长。[结果]观察组护生“静脉输液法”“壁式氧气吸入法”两项考核项目的操作流程的完整性、知识点掌握程度评分和操作时长均明显优于对照组(均P<0.05)。[结论]“临床教学机器人”在高职护生护理技能开放练习实训中可有效提高护生的专注力、技能操作动手能力和综合能力。
简介:作者简介谭平(1964-),女,重庆人,本科,副主任医师。摘要目的通过对老年冠心病患者采用脑心痛联合尼克地尔治疗,探讨联合用药的临床疗效。方法选择本院被确诊155例心绞痛住院患者采用自身前后对照的方法,在应用常规西药基础上加用脑心通,疗程30d,再加用尼克地尔,疗程30d,观察治疗前后心绞痛疗效、硝酸甘油用量、心电图指标等的变化和联合咬咬后患者的不良反应。结果脑心通组(N组)对心绞痛总有效为774%,脑心通联合尼可地尔组(L组)总有效率为922%,且减少硝酸甘油用量。N组心电图改善总有效率639%,L组心电图总改善率78%。结论脑心通组对老年人心绞痛有一定治疗效果,尼可地尔与脑心通组联合应用效果更好。
简介:目的:研究平目汤含药血清对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞的作用,探讨其治疗Graves眼病的机制。方法:采用组织块法将人Graves眼病眼眶前脂肪细胞原代培养并传代,选用间接免疫荧光技术鉴定;用平目汤药液灌胃SD大鼠制备平目汤含药血清,并配成低(5%)、中(10%)、高(20%)三个剂量组;油红O染色观察前脂肪细胞的诱导分化作用;MTT法检测平目汤对前脂肪细胞增殖的影响;流式细胞术检测平目汤对成熟脂肪细胞凋亡率的影响。结果:(1)通过组织块法成功培养出梭形细胞,间接免疫荧光检测为前脂肪细胞。(2)成功诱导前脂肪细胞分化,油红O染色证实为成熟脂肪细胞。(3)平目汤各组均可显著抑制前脂肪细胞的分化,与空白对照组及地塞米松组比较差异明显。(4)平目汤各组均可下调前脂肪细胞增殖活性,以平目汤中剂量组、干预96h效果最佳,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(5)平目汤各组成熟脂肪细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.05),以平目汤中剂量组效果最佳。结论:平目汤含药血清可抑制人Graves眼病眼眶前脂肪细胞增殖、促进眼眶成熟脂肪细胞凋亡、减少眼眶脂肪细胞的数量,从而减少眼眶脂肪容积、改善Graves突眼症状。
简介:摘要目的探讨用于亨廷顿病治疗提供的药物筛选模型,为亨廷顿病的药物治疗提供理论支持和实验依据。方法SD大鼠45只,分为正常对照组、毁损组、移植组3组,每组15只。正常组不予以处理,其余两组均用奎宁酸(QA)脑内注射,移植组在QA毁损模型建立后进行人诱导多能干细胞hiPSC移植。hiPSC在大鼠脑内存活了7周,通过阿扑吗啡诱导旋转实验等行为学实验,观察各组大鼠运动功能情况;通过高十字迷宫、新环境抑制进食实验,观察各组焦虑类似的行为变化。结果与QA组相对比,观察到hiPSC移植组大鼠运动功能得到改善,大鼠焦虑类似的行为明显减少。hiPSC移植组大鼠的活动减少。结论hiPSC移植可以有效的改善HD大鼠的行为缺陷,hiPSC在治疗神经退行性疾病特别是HD亨廷顿病,是一种理想的多潜能干细胞来源。
简介:目的:探讨蟾毒灵诱导人胰腺癌细胞凋亡及其对Survivin基因表达的影响。方法:建立裸鼠人胰腺癌模型,随机分为4组:对照组(NS)、5-氟尿嘧啶组(5-Fu)、蟾毒灵组(Bu)、蟾毒灵加5-氟尿嘧啶组(Bu/5-Fu)。分别腹腔注射生理盐水(NS)20ml/kg、5-Fu24mg/kg、Bu1mg/kg、Bu1mg/kg+5-Fu24mg/kg。用药后第7天处死,计算肿瘤生长抑制率,TUNEL法检测瘤体凋亡指数,免疫组化S-P法检测Survivin蛋白的表达,RT-PCR法检测SurvivinmRNA的表达。结果:与NS组相比,各药物干预组瘤体体积均显著缩小(P〈0.05),凋亡指数明显增高(P〈0.01),Survivin蛋白的表达显著降低(P〈0.01)。其中Bu/5-Fu组瘤体体积明显小于Bu组、5-Fu组(P〈0.05);Bu/5-Fu组凋亡指数明显高于Bu组、5-Fu组(P〈0.01);Bu/5-Fu组Survivin蛋白的表达明显低于Bu组、5-u组(P〈0.01)。结论:蟾毒灵能够抑制胰腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,联合5-Fu可起到增效的作用。其作用机制可能与抑制Survivin基因表达有关。